防蚴润肤霜防御日本血吸虫尾蚴感染的研究

黄轶昕 　高智慧 , 　蔡　刚, 　吴　锋 ,张燕萍 , 　姜玉骥 , 　奚伟萍, 　洪青标 , 　孙乐平
摘要:目的实验评价新型涂肤防护剂—防蚴润肤霜防御日本血吸虫尾蚴感染的效果,并了解其对皮肤的急性刺激反应。方法采用模拟现场试验方法,分别在小白鼠腹部和尾部涂布防蚴润肤霜,并经泥水浸泡洗刷4～8h 后接种日本血吸虫尾蚴,饲养40 d 解剖小鼠观察感染情况。以小鼠感染率、平均虫荷数和减虫率为评价指标,同时进行皮肤急性刺激试验。结果防蚴润肤霜涂布小鼠腹部、尾部后减虫率达100 %;家兔皮肤急性刺激试验结果为阴性。结论防蚴润肤霜涂布皮肤后4～8 h 具有完全防御日本血吸虫尾蚴感染的作用,对皮肤无刺激作用。
关键词: 　日本血吸虫; 　尾蚴; 　防蚴润肤霜; 　急性皮肤刺激试验
　　日本血吸虫生长过程中唯有尾蚴能主动钻入人和动物皮肤(或粘膜) 而导致感染[1 ,2 ] ,因此防止尾蚴侵入皮肤(简称防蚴,下同) 即可防止血吸虫感染。国内曾筛选研制了多种防蚴药物[3～5 ] ,常用的涂肤防护剂主要有邻苯二甲酸二丁酯油膏和乳剂,均有良好的防护作用。但前者油腻太重,群众不易接受,后者则涂展性较差,且包装和携带不便。为了适应现场防治工作需要,我们以邻苯二甲酸二丁酯为主药,研制了改良型涂肤防蚴剂- 防蚴润肤霜,并进行了防蚴效果观察,现报告如下:
1 内容和方法
1.1 　模拟现场防护试验
1.1.1 　材料　防蚴润肤霜(含15 %邻苯二甲酸二丁酯) :由本所血吸虫病室研制。防蚴润肤霜基质(不含邻苯二甲酸二丁酯) :由本所血吸虫病室配制。防护油膏(含50 %邻苯二甲酸二丁酯) :按《血吸虫病防治手册》配制备用[3 ] 。尾蚴:本所培养的感染性钉螺按常规法逸蚴备用。NIH 小白鼠40 只,体重25 ±3g。
1.1.2 　方法
1.1.2.1 　小白鼠腹部防护试验　将实验鼠随机分成A1 、B1 、C1 、D14 组,每组小鼠10 只。实验前小鼠腹部剃毛2 ×215cm ,A1 、B1 、C1 组分别用防蚴润肤霜、防护油膏和防蚴润肤霜基质均匀涂布于小鼠腹部去毛区,D1 组不涂防护剂作为空白对照组。然后将小鼠分别置于盛有泥浆的搪瓷桶内(搪瓷桶直径50cm 底部铺垫细泥2cm , 加水至3cm ,搅匀) ,使小鼠腹部充分浸泡于泥浆水中,分别在泥浆水中活动洗刷4 h 、8 h 后取出小鼠用清水冲洗,然后在小鼠腹部接种血吸虫尾蚴,每鼠接种尾蚴20 ±2 条。小鼠接种感染后40 d 解剖观察结果,计算小鼠感染率、平均虫荷数以及减虫率。减虫率计算公式为:
减虫率= 对照组虫荷数- 实验组虫荷数对照组虫荷数×100 %
1.1.2.2 　小白鼠尾部防护试验　将实验小鼠随机分成A2 、B2 、C2 、D24 组,每组小鼠12 只。A2 、B2 、C2 组分别用防蚴润肤霜、防护油膏和防蚴润肤霜基质均匀涂布于小鼠尾巴,D2 组不涂防护剂作为空白对照组。然后将小鼠分别置于盛有泥浆的搪瓷桶内(同上) ,使小鼠尾部充分浸泡于泥浆水中,4 h 后取出小鼠用清水冲洗,然后将小鼠尾部置于有血吸虫尾蚴的水中,每鼠感染尾蚴20 ±2 条。小鼠感染后40 d 解剖观察结果,计算小鼠感染率、平均虫荷数,以及减虫率(同上) 。
1.2 　防蚴润肤霜对家兔皮肤急性刺激反应试验
1.2.1 　材料　家兔4 只,体重210 ±012kg ,由本所动物房提供。防蚴润肤霜30g。
1.2.2 　方法　按GB7919 - 87[6 ] 。实验前24 h将家兔背部剪去毛,面积为10 ×15cm ,不损伤皮肤。实验时将每只家兔背部左侧涂敷防蚴润肤霜,涂敷面积为215 ×215cm。右侧空白作对照。涂药处用一层油纸、两层纱布覆盖固定24 h 。涂药后24 h 用湿纱布洗除药物,并分别于涂药后24h 、48 h 和72 h 观察涂药部位皮肤反应,皮肤反应标准见表1 。根据24 h 、48 h 、72 h 观察得分平均值,按表2 判断刺激强度。


2 　结果
2.1 　小白鼠模拟防护试验
　　防蚴润肤霜及防护油膏涂布小鼠腹部,经4 h和8 h 泥浆浸泡后接种尾蚴,小鼠均无血吸虫感染,减虫率达100 %;涂布小鼠尾部并经4 h 泥浆浸泡后接种尾蚴,小鼠均无感染,两药减虫率亦达100 % ,而防蚴润肤霜基质涂布小鼠腹部和尾部后浸泡4 h 也具有一定防护作用,小鼠感染率分别为20.00 %和33.33 % ,减虫率分别为78.81 %和60.00 %; 而对照组小鼠感染率则分别为100.00 %和66.67 %(表3 、表4) 。

2.2 　防蚴润肤霜对家兔皮肤急性刺激反应试验
　　家兔在涂药后24 h 、48 h 、72 h ,受药部位皮肤均未见红斑和水种。24 h 、48 h 、72 h 得分的平均值为0 ,按表2 判断标准,防蚴润肤霜对皮肤无刺激性。
3 　讨论
　　个人防护是血吸虫病预防的一项重要措施。因生产或生活的需要,在既不能避免接触疫水,又不能消灭钉螺和杀灭水中尾蚴,却又必须下水的情况下,使用涂肤防护剂是防止血吸虫感染的有效手段之一。通常防护剂的作用可分为机械防护和化学杀蚴两类[7 ] ,本研究所用防蚴润肤霜兼有机械防护和化学杀蚴作用,同时还兼有润肤作用。
　　模拟现场的动物实验结果表明,防蚴润肤霜及防护油膏涂布小鼠腹部,经4 h 和8 h 泥浆浸泡后接种尾蚴, 小鼠均无血吸虫感染, 减虫率达100 %;涂布小鼠尾部并经4 h 泥浆浸泡后接种尾蚴,小鼠均无感染,两药减虫率亦达100 % ,表明防蚴润肤霜与传统的防护油膏一样,涂肤后4～8h 内对血吸虫尾蚴具有完全的防御作用。
　　防蚴润肤霜涂肤后感觉细腻润泽,具有良好的涂展性和稳定性,对皮肤无刺激作用,而防护油膏涂肤后感觉粘滞不适。同时前者的直接成本(原料) 尚不到后者的一半,显然防蚴润肤霜更适合现场推广应用。目前该新型涂肤防护剂已有70 000 多人份用于现场,其现场人群防护作用有待进一步评估研究。