高效液相色谱法测定染发剂中对苯二胺及某些酚类物质的含量

    郑志方( 国家香料香精化妆品质量监督检验中心 上海 200232)

    摘要:本文采用丁高效渡相色谱{击测定染发剂中对苯二胺、邻氨基酚、对苯二酚及间苯二酚。该法筒便快速．检测下限分别为0．089、0．25、0 0019和0．0033毫克／克．具有良好的精密度和准确度 ， 

    关键词:对苯二胺 邻氨基酚 对苯二酚 间苯二酚 染发剂 测定 高效液相色谱法

    一、引言

    目前，由于人民生活水平的提高，染发剂作为一种特殊化妆品，受到了人们的欢迎。染发剂中常常要用到染料中间体对苯二胺、邻氨基酚和助染剂对苯二酚、间苯二酚等。然而，这些物质具有一定的毒性．如致敏性和致癌性。因此．在我国化妆品卫生标准中，把它们定作限用物质。它们在染发荆中的最大

允许浓度，对苯二胺为6％，邻氨基酚为10％，对苯二酚为2％，间苯二酚为5％ 。为了保护消费者的健康，建立这些物质的分析方法是必要的。

    上述物质虽然可以用薄层色谱法或气相色谱法来测定．但两法都有不足之处。因为这些物质极性大．挥发度低，再加上染发剂中的其它高沸点添加物．给气相色谱分析带来了不少麻烦。另外，用薄层色谱法定量的准确度也不是很高。而用高效液相色谱法分析．正好弥补了它们的不足。

    在用高效液相色谱法分析时，由于对苯二胺和邻氨基酚的性质比较接近．而对苯二酚干矗间苯二酚又是同分异构体．需要精心选择适当的分离条件。就是说在C18反相色谱柱确定的情况下，需要选择一个恰当的洗脱液体系。经试验．甲醇一水、乙氰一水及甲醇一乙氰一水，都不能使组份很好的分离，唯独四氢呋喃一水体系在后述最佳条件下才能得到满意的结果。

    另外，如周知，上述测定物质为化学过敏物质，特别是对苯二胺．配好的溶液在几分钟之内就会变色，因为发生了氧化和绾台反应。如果对苯二胺与酚类物质混台配制在一起，则会更迅速地变色．这是因为．对苯二胺分子披空气中的o2氧化后．马上又与酚生成靛酚，使颜色加深。鉴于此．本方法在配制标准溶液、预处理试样和分析样品时，采用如下三种对策：(1)加入抗化学过敏物质，如还原剂亚硫酸钠；(2)单独配制对苯二胺和邻氨基酚标准溶液；(3)分析操作尽可能快．最好当天分析完毕。

    二、最佳分离条件

    最佳分离条件的选择颇费周折．最终确定如下：

    仪器：Waters高效液相色谱仪，810工作站

    色谱柱：μBondapak Cl8．3．9×300ram

    检测器：481紫外检测器，0．05AUFS．280nm

    流动相： 20/80= 四氢呋喃／0．005MNaH2P04(用H3PO4调至pH=3．5)

    流速：2ml／分

    进样量：20μl

    组份分离色谱图如图1。

    

    三、线性关系

    

    线性关系是定量分析的基础。只有在被测组份的浓度与仪器响应值之间存在良好的线性关系，才能建立起来定量方法，并能由此得知具体样品的称量数量及稀释倍数。本方法分别研究了对苯二胺、邻氨基酚、对苯二酚和间苯二酚的线性关系．结果见表1、表2及图2～5。可以看出，各被测组份的线性关系是良好的。

    

    四、试样的预处理

    经试验，把乙氰一水、四氢呋喃一水和乙醇一水用作萃取剂．都可达到目的。从经济角度考虑，本方法采用95％乙醇／水：50／50(体积比)作为萃取剂，每1克左右试样萃取剂用量为10毫升。可将试样预先称入比色管中，并加入1％亚硫酸钠溶液，再加该萃取剂至10毫升刻度。应在室温下进行超声渡萃取，避免温度过高而加速被测组份的变化。萃取时间也不宜过长．15分钟即可。另外，配制标准溶液时，可以将该萃取剂用作稀释剂。

    五、回收率

    进行回收率的测定．以确定本方法的准确度。本方法是先将油酸、三乙醇胺和水混合，作为本底，然后分别加入对苯二胺、邻氨基酚、对苯二酚和间苯二酚，取混合物1～2毫升于比色管中，并加入0．5毫升1％亚硫酸钠溶液，再加萃取剂至1O毫升刻度．室温下超声波萃取15分钟．过滤，取母液20微升进样，外标法定量，结果见表3。由表3可知，变异系数为2～4％ ，回收率为92～100％ ．表明本方法的精密度和准确度是可以满足要求的。

   

    六、最低检出量和最低检出浓度

    各被测组份的最低检出量和最低检出浓度见表4。由表4可知，这样的最低检出量和最低检出浓度是完全能满足实际需要的。

    

    七、小结

    本文叙述了用高效液相色谱法测定染发剂中对苯二胺及某些酚类物质的方法。本方法建立了各被测组份的色谱最佳分离条件，各组份的线性关系是良好的。精密度和准确度较高，样品的预处理并不烦琐。因此，本方法可以用来对染发荆中上述限用物质进行快速而准确的测定。